Иммуннохимические аспекты диагностики и контроля антиретровирусной терапии ВИЧ-больных

Хаертынова И. М., Баширова Д. К., Рязанова Г. А., Макарова М. В., Коксин В. П., Мустафин И. Г.

Республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИД МЗ РТ, Казанская медицинская академия.

Изменения метаболитической активности иммунокомпетентных клеток, устанавливающие новый уровень функционирования иммунной системы инфицированных ВИЧ, которая сохраняет способность к осуществлению значительно варьирующей функции, зависящей от её способности элиминировать вирус, несомненно, происходят не только под действием ВИЧ, но и его структурных белков. Существенно большая продолжительность периода между началом острых проявлений и сероконверсией в течение ВИЧ-инфекции, который может длиться более полугода, по отношению к другим вирусным инфекциям (10-14 суток) требует детального изучения начальной стадии развития гуморального иммунного ответа при данной патологии (Абэлян А.В. и др., 1998).

Следовательно, изучение функциональной активности иммунокомпетентных клеток, таких как организация надмолекулярного комплекса ДНК, апоптоза клеток, степени продукции вируса, его белков и антител к ним и т.д. послужит разработке критериев патогенетического состояния ВИЧ-больных, которые можно считать основой для разграничения этапов развития ВИЧ-инфекции. Если метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) по определению количества вирусного генома на сегодняшний день позволяет контролировать антиретровирусную терапию и делать её более эффективной, то природа изменений и закономерностей динамики иммунохимических маркёров ВИЧ-инфекции, в частности спектра антител к индивидуальным вирусным белкам, недостаточно изучена. Поэтому работа, направленная на разработку научнообоснованных критериев оценки иммунопатогенеза, в частности, на изучение спектра свободных и связанных в ЦИК анти-ВИЧ-антител к индивидуальным белкам ВИЧ в сыворотках крови ВИЧ-инфицированных людей, актуальна. Нами показано, что начиная с IIВ и кончая терминальной стадиями ВИЧ-инфекции в иммуноблотинге уменьшалась интенсивность реакции анти-ВИЧ АТ с белками gag, pol с относительным увеличением ее к гликопротеинам env, сопровождавшаяся снижением CD4+, а в терминальной стадии и CD8+ до нижней границы нормы. В случайной выборке ВИЧ-больных, находящихся на различных стадиях заболевания (в основном на стадиях IIБ и IIB), было показано, что у всех пациентов выявлялись антитела к белкам ВИЧ, кодируемым всеми структурными генами ВИЧ в различной мере. Отмечены различия в преобладании интенсивности реакции антител с белками гена gag ВИЧ у 56,50% больных, равенство этих показателей у 34,78% и преобладание интенсивности реакции анти-ВИЧ антител с белками гена env у 8,69% ВИЧ-больных. Иммунный статус исследованной группы свидетельствовал о довольно большом количестве лимфоцитов, несущих маркёры CD4+ и CD8+. При проведении мониторинга иммунного статуса и частоты встречаемости анти-ВИЧ антител к белкам ВИЧ у ВИЧ-больных на фоне антиретровирусной терапии была отмечена динамика перераспределения интенсивности реакции анти-ВИЧ антител с белками генов gag, pol, env, заключавшаяся в относительном увеличении интенсивности реакции анти-ВИЧ в сыворотках крови к белкам генов gag, pol по отношению к env и, сопровождавшаяся уменьшением относительного показателя активности анти-ВИЧ АТ к gp160, gp120. При 8-ми летней антиретровирусной терапии 2-х больных (IIIБ), из которых 6 - монотерапия АЗТ, титры анти-ВИЧ АТ в ИФА в течение всего 1999 года составляли 1:16000-1:20000, что свидетельствует об относительно высоком уровне иммунной системы.

Препараты сывороток крови ЦИК, очищенные от свободных белков плазмы крови, диссоциировали температурным воздействием при +60°С, предварительно поместив их в отрицательные по ВИЧ сыворотки. В 7-ми из 8-ми случаев тест-системой ИФА в ЦИК выявлялись анти-ВИЧ АТ в титрах от 1:10 до 1:40 при отсуствии корреляции с активностью исходных сывороток (1:2000-1:20000). Качественной и количественной оценкой результатов иммуноблотинга денсиметрией установлено, что интенсивность реакции и состав анти-ВИЧ АТ ЦИК к отдельным белкам ВИЧ в иммуноблотинге отличались от активности и спектра свободных анти-ВИЧ АТ сывороток крови. Так, анти-ВИЧ АТ ЦИК всех больных интенсивней реагировали с белками гена env (67,2-85,8% против 38,0-49,8%), где серодоминантной фракцией являлся gp160; более низкий уровень реакции с белками gag (11,0-26,4% против 23,0-41,9%) сопровождался отсутствием анти-ВИЧ АТ к р40, р18 во всех ЦИК; во всех пробах ЦИК не выявлялись анти-ВИЧ АТ к р34 при тенденции снижения уровня реакции с белками гена pol.

Полученные результаты, по видимому, указывают на наличие механизмов регуляции антигенемии в процессе развития ВИЧ-инфекции и вовлечение в процесс факторов, связывающих иммуноглобулины и в том числе анти-ВИЧ антитела в плазме крови.

Оценку активности анти-ВИЧ АТ к белкам генов gag, pol и env ВИЧ рационально использовать при мониторинге инфекционного процесса наряду с клинической симптоматикой и определением варьирующего количества CD4+ лимфоцитов.

Сб. тез. Межд. конфер. "Инфекци-онные болезни", Харьков, 2001, С 153.