Выявление скрытых анти-ВИЧ антител в циркулирующих иммунных комплексах сыворотки крови при ВИЧ-инфекции

Рязанова Г. А., Коксин В. П., Мустафин И. Г., Хаертынова И. М., Замятина Э. А., Романенко О. М.

Республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИД МЗ РТ, Казань

Известно, что в сыворотках крови в скрытом состоянии находится значительное количество антител, способных взаимодействовать с различными антигенами, количество которых зависит от клинического состояния человека. Целью работы было оптимизация способа получения циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) из сывороток ВИЧ-инфицированных людей, диссоциации ЦИК, изучение активности и спектра анти-ВИЧ антител (ан.-ВИЧ АТ) к структурным белкам вируса у 54 больных на стадии бессимптомного вирусоносительства (IIБ), первичных клинических проявлений (IIВ), в сыворотках которых отмечено присутствие "свободных" ан.-ВИЧ АТ белкам кодируемыми генами env, gag, pol и на начальной стадии формирования ан.-ВИЧ АТ. Все больные не принимали антиретровирусную терапию. За основу получения ЦИК из сыворотки крови нами был взят метод осаждения с различными концентрациями полиэтиленгликоля с молекулярным весом 6000 (ПЭГ-6000) в боратном буфере рН 8,8. Раствор 3,5% ПЭГ-6000 обеспечивал выделение двух фракций ЦИК: "быстро" (18ч - ЦИК-1) и "медленно" преципитирующих (72ч - ЦИК-2) фракций, а также не преципитировал "свободные" ан.-ВИЧ АТ, по сравнению с концентрациями 7%, и 10,5%. Препараты ЦИК, очищенные от свободных белков плазмы крови, диссоциировали температурным воздействием при +60°С, предварительно поместив их в отрицательные по ВИЧ сыворотки. Методом ИФА в группе начальной стадии развития инфекции ан.-ВИЧ АТ в ЦИК-1 выявлены в 3-х случаях (13%), а в ЦИК-2 у одного в титрах 1:4-1:8, представленные ан.-ВИЧ АТ к gp160 и p25. У группы IIБ в ЦИК-1 выявлена активность у 56% (1:16-1:128), в ЦИК-2 у 44% больных (1:4-1:64), а в группе IIВ у 100% и у 75% пациентов с титрами 1:9-1:128 и 1:9-1:36 соответственно. Характерно было постоянное присутствие в этих группах ан.-ВИЧ АТ во фракциях ЦИК к предшественнику гликопротеинов gp160, gp120, р25 и отсутствие к р18 при варьирующем спектре антител к другим структурным белкам вируса. Отличительной особенностью в группе IIВ было наличие антител к gp41 в пуле ан.-ВИЧ АТ ЦИК-1, ЦИК-2. Таким образом, в исследованных пробах ЦИК сывороток крови ВИЧ-инфицированных отмечали содержание "скрытых антител" к белкам ВИЧ, качественный состав которых не коррелировал со спектром "свободных" анти-ВИЧ антител сывороток. По-видимому, это свидетельствует о наличии механизмов регуляции циркуляции вирусных антигенов в крови и вовлечении в процесс факторов, связывающих иммуноглобулины и в том числе ан.-ВИЧ антитела.

Тезисы научных докладов III съезда биохимического общества. Санкт-Петербург, 26.06-01.07. 2002, С. 211.